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胰蛋白酶消化液

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胰蛋白酶消化液 產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品介紹:

抗原修復(fù)用于甲醛固定的石蠟包埋組織切片。石蠟切片標(biāo)本用甲醛固定,使得細(xì)胞內(nèi)抗原形成醛鍵、 羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇, 同時(shí)蛋白之間發(fā)生交聯(lián)而使抗原決定簇隱蔽。所以要求在進(jìn)行免疫組化染色時(shí),需要行抗原修復(fù)或暴露,即將固定時(shí)分子之間所形成的交聯(lián)破壞,而恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。

酶消化方法是常用的抗原修復(fù)方法之一,常用 0.1%胰蛋白酶和 0.4%胃蛋白酶液。一般說(shuō)來(lái),胰蛋白酶消化能力較胃蛋白酶弱,主要用于細(xì)胞內(nèi)抗原的消化,胃蛋白酶主要用于細(xì)胞間抗原的消化。工作中要認(rèn)真參照抗體說(shuō)明書指示進(jìn)行消化酶的選擇,這樣針對(duì)性更強(qiáng),標(biāo)記效果更理想。

操作說(shuō)明:

胰蛋白酶使用前預(yù)熱 37℃,切片也預(yù)熱 37℃,消化時(shí)間約為 5~30 分鐘;胃蛋白酶消化 37℃時(shí)間為 30 分鐘。適用于被固定遮避的抗原,其中有:Collagen,Complement,Cytokeratin,C-erB-2,GFAP,LCA,LN 等。

胰蛋白酶處理

1、滴加一滴胰蛋白酶工作液于組織上。

2、室溫或 37℃孵育 20-40 分鐘,孵育時(shí)間的長(zhǎng)短依福爾馬林固定時(shí)間及所測(cè)抗原情況而定。

3、蒸餾水沖洗,終止反應(yīng)。

4、阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。

5、免疫組化染色。

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